Еден свет еден борба
─Меѓународна соработка за изградба на глобална заедница на заедничка судбина која одговара на пандемискиот предизвик COVID-19
Романот коронавирус што го зафати светот резултираше со тековна глобална пандемична криза СОВИД-19.Романот коронавирус нема граници, ниту една земја нема да биде поштедена од оваа битка против СОВИД-19.Како одговор на оваа светска пандемија COVID-19, Liming Bio-Products Corp дава придонеси за поддршка на благосостојбата на нашите глобални заедници.
Нашиот свет моментално се соочува со невидено влијание на пандемијата на новата коронавирусна болест 2019 (СОВИД-19).До денес, не постои ефикасен лек за лекување на оваа болест.Сепак, развиени се многу дијагностички тестови за откривање на СОВИД-19.Овие тестови се засноваат на молекуларни или серолошки методи за откривање на новиот коронавирус специфичен нуклеинска киселина или биомаркери за антитела.Бидејќи СОВИД-19 достигна статус на пандемија, раната дијагноза на инфекцијата со новиот коронавирус е од клучно значење во проценката на ширењето на вирусот и неговото задржување, но совршен тест за универзална употреба сè уште не постои.Мораме да знаеме кои тестови потенцијално би можеле да се користат за скрининг, дијагноза и следење на инфекцијата COVID-19 и кои се нивните ограничувања.Многу е важно како подобро да се искористат овие научни алатки и да се помогне да се идентификува и контролира појавата на оваа брзо ширење и сериозна болест.
Целта на откривањето на новиот коронавирус е да се утврди дали поединецот кој има инфекција со СОВИД-19 или асимптотичниот носител кој може тивко да го шири вирусот, да обезбеди суштински информации кои ќе го водат донесувањето одлуки за клинички третман.Претходните студии покажаа дека 70% од клиничките одлуки зависат од резултатите од тестирањето.Кога се користат различни методи за откривање, барањата на комплетите со реагенси за откривање се исто така различни.
Слика 1
Слика 1:Дијаграм што ги прикажува клучните фази на општите нивоа на биомаркери за време на типичниот временски тек на инфекцијата COVID-19.X-оската го означува бројот на денови на инфекција, а Y-оската го покажува вирусното оптоварување, концентрацијата на антигени и концентрацијата на антителата во различни периоди.Антитела се однесува на IgM и IgG антитела.И RT-PCR и детекцијата на антиген се користат за откривање на присуството или отсуството на нов коронавирус, што е директен доказ за рано откривање на пациентот.Во рок од една недела од вирусна инфекција, се претпочита откривање на PCR или откривање на антиген.По инфекцијата со новиот коронавирус околу 7 дена, IgM антителото против новиот коронавирус постепено се зголемува во крвта на пациентот, но времетраењето на постоењето е кратко, а неговата концентрација брзо се намалува.Спротивно на тоа, IgG антителото против вирусот се појавува подоцна, обично околу 14 дена по инфекцијата со вирусот.Концентрацијата на IgG постепено се зголемува и таа опстојува долг период во крвта.Така, ако IgM се открие во крвта на пациентот, тоа значи дека вирусот неодамна се заразил, што е маркер за рана инфекција.Кога антителото IgG ќе се открие во крвта на пациентот, тоа значи дека вирусната инфекција е веќе некое време.Се нарекува и доцна инфекција или претходна инфекција.Често се забележува кај пациенти кои се во фаза на опоравување.
Биомаркерите на новиот коронавирус
Новиот коронавирус е РНК вирус, кој се состои од протеини и нуклеински киселини.Вирусот го напаѓа телото на домаќинот (човечкото) тело, навлегува во клетките преку местото на врзување што одговара на рецепторот ACE2 и се реплицира во клетките домаќини, предизвикувајќи човечкиот имунолошки систем да реагира на странските напаѓачи и да произведува специфични антитела.Затоа, нуклеинските киселини и антигени од вијалата и специфичните антитела против новиот коронавирус теоретски може да се користат како специфични биомаркери за откривање на новиот коронавирус.За откривање на нуклеинска киселина, најчесто се користи технологијата RT-PCR, додека серолошките методи најчесто се користат за откривање на новите антитела специфични за коронавирусот.Во моментов, достапни се различни методи за тестирање што можеме да ги избереме за тестирање на инфекција со COVID-19 [1].
Основни принципи на главните методи за тестирање на новиот коронавирус
Досега се достапни многу дијагностички тестови за COVID_19, со повеќе комплети за тестирање кои добиваат одобрение според овластување за итна употреба секој ден.Иако новите тестови излегуваат со толку многу различни имиња и формати, сите тековни тестови за COVID_19 во основа се потпираат на две главни технологии: откривање на нуклеинска киселина за вирусна РНК и серолошки имуноанализи кои откриваат вирусни специфични антитела (IgM и IgG).
01. Откривање на нуклеинска киселина
Обратна транскрипција-полимеразна верижна реакција (RT-PCR), изотермално засилување со посредство на јамка (LAMP) и секвенционирање од следната генерација (NGS) се вообичаените методи на нуклеинска киселина за откривање на новата РНК на коронавирус.RT-PCR е првиот тип на тест за COVID-19, препорачан и од Светската здравствена организација (СЗО) и од Центарот за контрола и превенција на болести на САД (ЦДЦ).
02.Серолошка детекција на антитела
Антителата се заштитен протеин произведен во човечкото тело како одговор на вирусна инфекција.IgM е ран тип на антитела додека IgG е антитело од подоцнежен тип.Примерокот од серумот или плазмата обично се испитува за присуство на специфични IgM и IgG типови на антитела за проценка на акутните и реконвалесцентните фази на инфекцијата COVID-19.Овие методи за откривање базирани на антитела вклучуваат имунохроматографија на колоидно злато, имунохроматографија на латекс или флуоресцентна микросфера, ензимски имуносорбентна анализа (ELISA) и хемилуминисценција.
03. Откривање на вирусен антиген
Антигенот е структура на вирусот препознаена од човечкото тело која го поттикнува имунолошкиот одбранбен систем да произведува антитела за да го исчисти вирусот од крвта и ткивата.Вирусен антиген присутен на вирусот може да се таргетира и открие со користење на имуноанализа.Како и вирусната РНК, вирусните антигени се исто така присутни во респираторниот тракт на заразените лица и може да се користат за дијагностицирање на акутната фаза на инфекцијата СОВИД-19.Затоа, често се препорачува собирање примероци од горните дишни патишта, како што се плунка, назофарингеални и орофарингеални брисеви, спутум од длабока кашлица, течност за бронхоалвеоларна лаважа (BALF) за првично антигенско тестирање.
Избор на методи за тестирање за нов коронавирус
Изборот на метод за тестирање вклучува многу фактори, вклучувајќи ги клиничките услови, контролата на квалитетот на тестирањето, времето на завршување, трошоците за тестирање, методите за собирање примероци, техничките барања за лабораторискиот персонал, барањата за капацитети и опрема.Откривањето на нуклеинските киселини или вирусните антигени треба да обезбеди директен доказ за присуството на вирусите и да ја потврди дијагнозата на нова инфекција со коронавирус.Иако постојат многу методи за откривање на антиген, нивната чувствителност на откривање на новиот коронавирус е теоретски помала од онаа на засилувањето RT-PCR.Тестирањето на антитела е откривање на анти-вирусни антитела произведени во човечкото тело, кои заостануваат во времето и честопати не можат да се користат за рано откривање за време на акутната фаза на вирусна инфекција.Клиничките поставки за апликациите за откривање може да се разликуваат, а местата за собирање примероци исто така може да бидат различни.За откривање на вирусни нуклеински киселини и антигени, примерокот треба да се собере во респираторниот тракт каде што е присутен вирусот, како што се назофарингеални брисеви, орофарингеални брисеви, спутум или течност за бронхоалвеоларна лаважа (BALF).За откривање базирано на антитела, треба да се собере примерок од крв и да се испита за присуство на специфични антивирусни антитела (IgM/IgG).Сепак, резултатите од тестот за антитела и нуклеинска киселина може да се надополнуваат еден со друг.На пример, кога резултатот од тестирањето е негативен на нуклеинска киселина, IgM-негативен, но IgG позитивен, овие резултати укажуваат дека пациентот моментално не го носи вирусот, туку дека е излечен од новата инфекција со коронавирус.[2]
Предности и недостатоци на новите тестови за коронавирус
Во Протоколот за дијагноза и третман за нова коронавирусна пневмонија (пробна верзија 7) (објавен од Националната здравствена комисија и државната управа за традиционална кинеска медицина на 3 март 2020 година), тестирањето на нуклеинска киселина се користи како метод на златен стандард за дијагноза на романот инфекција со коронавирус, додека тестирањето на антитела исто така се смета како еден од методите за потврда за дијагноза.
Патогени и серолошки наоди
(1) Патогени наоди: Новата нуклеинска киселина на коронавирус може да се открие во назофарингеални брисеви, спутум, секрети од долниот респираторен тракт, крв, измет и други примероци со помош на методите RT-PCR и/или NGS.Попрецизно е ако примероците се добиени од долниот респираторен тракт (екстракција на спутум или воздушен тракт).Примероците треба да се достават на тестирање што е можно поскоро по собирањето.
(2) Серолошки наоди: IgM специфичен за NCP вирусот станува забележлив околу 3-5 дена по почетокот;IgG достигнува титрација од најмалку 4 пати зголемување за време на реконвалесценцијата во споредба со акутната фаза.
Сепак, изборот на методи за тестирање зависи од географските локации, медицинските прописи и клиничките поставки.Во Соединетите Американски Држави, НИХ издаде Упатства за третман на коронавирусна болест 2019 (СОВИД-19) (Ажурирано на страницата: 21 април 2020 година) и ФДА издаде Политика за дијагностички тестови за коронавирусна болест-2019 за време на итната состојба во јавното здравство (издадена на 16 март 2020, ), во кое серолошко тестирање на антителата IgM/IgG избрани само како скрининг тест.
Метод за откривање на нуклеинска киселина
RT_PCR е високо чувствителен тест на нуклеинска киселина дизајниран да открие дали е присутна или не новата РНК на коронавирус во респираторниот или друг примерок.Позитивниот резултат од PCR тестот значи присуство на нова РНК на коронавирус во примерокот за да се потврди инфекцијата COVID-19.Негативниот резултат од PCR тестот не значи отсуство на вирусна инфекција бидејќи на неа може да влијае слабиот квалитет на примерокот или временската точка на болеста во фазата на опоравување итн.Иако RT-PCR е високо чувствителен тест, тој има неколку недостатоци.Тестовите RT-PCR може да бидат трудоинтензивни и одземаат многу време, што суштински зависи од високиот квалитет на примерокот.Ова може да биде предизвик затоа што количината на вирусна РНК не само што варира огромно помеѓу различни пациенти, туку може да варира и кај ист пациент во зависност од временските точки кога се собира примерокот, како и од фазите на инфекција или од почетокот на клиничките симптоми.За откривање на новиот коронавирус потребни се висококвалитетни примероци кои содржат доволно количество недопрена вирусна РНК.
Тестот RT-PCR може да даде неточен негативен резултат (лажно негативен) за некои пациенти кои имаат инфекција со COVID-19.Како што знаеме, главните места за инфекција на новиот коронавирус се наоѓаат на белите дробови и долниот респираторен тракт, како што се алвеолите и бронхиите.Затоа, примерокот од спутум од длабока кашлица или течноста за бронхоалвеоларна лаважа (BALF) се смета дека има најголема чувствителност за откривање на вируси.Меѓутоа, во клиничката пракса, примероците често се собираат од горниот респираторен тракт со употреба на назофарингеални или орофарингеални брисеви.Собирањето на овие примероци не е само непријатно за пациентите, туку бара и специјално обучен персонал.За да се направи земање мостри помалку инвазивно или полесно, во некои случаи на пациентите може да им се даде орален брис и да им се дозволи да земат примерок од букалната слузница или брисењето на јазикот.Без доволно вирусна РНК, RT-qPCR може да врати лажно-негативен резултат од тестот.Во провинцијата Хубеи, Кина, чувствителноста на RT-PCR во првичното детектирање беше пријавена само околу 30%-50%, со просек од 40%.Високата стапка на лажно-негативни е најверојатно предизвикана од недоволно земање примероци.
Дополнително, RT-PCR тестот бара високо обучен персонал за извршување на сложени чекори за екстракција на РНК и процедура за засилување на PCR.Исто така, бара повисоко ниво на биосигурносна заштита, специјална лабораторија и инструмент PCR во реално време.Во Кина, RT-PCR тестот за откривање COVID-19 треба да се изврши во лаборатории на ниво на биосигурност 2 (BSL-2), со заштита на персоналот што користи практика на биобезбедност ниво 3 (BSL-3).Според овие барања, од почетокот на јануари до почетокот на февруари 2020 година, капацитетот на лабораторијата за ЦДЦ во Кина Вухан можеше да открие само неколку стотици случаи дневно.Нормално, тоа не би било проблем при тестирање на други заразни болести.Меѓутоа, кога се справуваме со глобална пандемија како што е СОВИД-19 со потенцијално милиони луѓе што треба да се тестираат, RT-PCR станува критично прашање поради неговите барања за специјални лабораториски капацитети или техничка опрема.Овие недостатоци може да го ограничат RT-PCR да се користи како ефикасна алатка за скрининг, а исто така може да доведат до одложувања во извештаите за резултатите од тестирањето.
Серолошки метод за откривање на антитела
Со напредокот на текот на болеста, особено во средната и доцната фаза, стапката на откривање на антитела е многу висока.Студијата во Централната јужна болница во Вухан покажа дека стапката на откривање антитела може да достигне повеќе од 90% во третата недела од инфекцијата СОВИД-19.Исто така, антителото е производ на човечкиот имунолошки одговор против новиот коронавирус.Тестот за антитела нуди неколку предности во однос на RT-PCR.Прво, серолошките антитела се тестираат едноставно и брзо.Тестовите за страничен проток на антитела може да се користат за да се добие резултат за 15 минути.Второ, целта откриена со серолошкиот тест е антителото, за кое е познато дека е многу постабилно од вирусната РНК.При собирање, транспорт, складирање и тестирање, примероците за тестови за антитела се генерално постабилни од примероците за RT-PCR.Трето, бидејќи антителото е рамномерно распоредено во циркулацијата на крвта, има помали варијации во земање примероци во споредба со тестот за нуклеинска киселина.Волуменот на примерокот потребен за тестот за антитела е релативно мал.На пример, 10 микролитри крв со убод од прст се доволни за употреба во тестот за страничен проток на антитела.
Општо земено, тестот за антитела е избран како дополнителна алатка за откривање на нуклеинска киселина за да се подобри стапката на откривање на новиот коронавирус за време на курсевите на болеста.Кога тестот за антитела се користи заедно со тест за нуклеинска киселина, може да ја зголеми точноста на анализата за дијагноза на COVID19 со намалување на потенцијалните лажно-позитивни и лажно-негативни резултати.Тековното упатство за работа не препорачува користење на два типа тестови одделно како независен формат за откривање, но треба да се користи како комбиниран формат.[2]
Слика 2:Правилно толкување на резултатите од тестовите за нуклеинска киселина и антитела за откривање на нова инфекција со коронавирус
Слика 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. - Нов коронавирус IgM/IgG антитела за двоен брз тест комплет (StrongStep®Брз тест за IgM/IgG антитела SARS-CoV-2, имунохроматографија со латекс)
Слика 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Нов коронавирус (SARS-CoV-2) Мултиплекс комплет за PCR во реално време (откривање за три гени, метод на флуоресцентна сонда).
Забелешка:Овој високо чувствителен комплет за PCR подготвен за употреба е достапен во лиофилизиран формат (процес на сушење со замрзнување) за долгорочно складирање.Комплетот може да се транспортира и чува на собна температура и е стабилен една година.Секоја епрувета од премиксот ги содржи сите реагенси потребни за засилување на PCR, вклучително и обратна транскриптаза, Taq полимераза, прајмери, сонди и dNTPs супстрати. Корисниците едноставно можат да ја реконституираат мешавината со додавање вода со PCR степен заедно со шаблонот и потоа да ја вчитаат на PCR инструмент за да се изврши засилувањето.
Како одговор на избувнувањето на новиот коронавирус, Liming Bio-Products Co., Ltd. работеше брзо за да развие два дијагностички комплети за да им овозможи на клиничките и јавно-здравствените лаборатории брзо да дијагностицираат инфекција со COVID-19.Овие комплети се многу погодни за употреба за скрининг од големи размери во земји и региони каде што брзо се шири епидемијата на новиот коронавирус, како и за обезбедување дијагноза и потврда за инфекција со КОВИД-19.Овие комплети се за употреба само под претходно известено одобрение за итна употреба (PEUA).Тестирањето е ограничено на лаборатории сертифицирани според прописите на националните или локалните власти.
Метод за откривање на антиген
1. Откривањето на вирусен антиген е класифицирано во истата категорија на директно откривање како и детекцијата на нуклеинска киселина.Овие методи за директно откривање бараат докази за вирусни патогени во примерокот и може да се користат за потврда на дијагнозата.Сепак, развојот на комплетите за детекција на антиген бара висок квалитет на моноклонални антитела со силен афинитет и висока чувствителност способни да препознаваат и заробуваат патогени вируси.Обично потребни се повеќе од шест месеци за да се избере и оптимизира моноклонално антитело погодно за употреба во подготовката на комплетот за детекција на антиген.
2. Во моментов, реагенсите за директно откривање на новиот коронавирус сè уште се во фаза на истражување и развој.Затоа, ниту еден комплет за детекција на антиген не е клинички потврден и комерцијално достапен.Иако претходно беше објавено дека дијагностичка фирма во Шенжен развила комплет за откривање антиген и клинички тестирана во Шпанија, веродостојноста и точноста на анализата не можеа да се потврдат поради присуството на проблеми со квалитетот на реагенсот.До денес, NMPA (поранешен FDA на Кина) сè уште нема одобрено никаков комплет за откривање антиген за клиничка употреба.Како заклучок, развиени се различни методи за откривање.Секој метод има свои предности и ограничувања.Резултатите од различни методи може да се користат за верификација и дополнување.
3. Производството на квалитетен комплет за тестирање COVID-19 силно зависи од оптимизацијата за време на истражувањето и развојот.Liming Bio-Product Co., Ltd.Тест комплетите се потребни за да се исполнат строгите стандарди за производство и контрола на квалитетот за да се осигура дека тие обезбедуваат највисоки нивоа на перформанси и конзистентност.Научниците од Liming Bio-Product Co., Ltd. имаат повеќе од дваесетгодишно искуство во дизајнирање, тестирање и оптимизирање на комплети за дијагностика ин витро за да обезбедат највисоко ниво на перформанси во аналитичката квантификација.
За време на пандемијата СОВИД-19, кинеската влада се соочи со наплив на огромна побарувачка за материјали за превенција од епидемија во меѓународните жаришта.На 5 април, на прес-конференцијата на Заедничкиот механизам за превенција и контрола на Државниот совет „Зајакнување на квалитетното управување со медицински материјали и регулирање на редот на пазарот“, Џијанг Фан, првостепен инспектор на Одделот за надворешна трговија на Министерството за трговија, рече: „Следно, ќе ги фокусираме нашите напори на два аспекта, прво, да ја забрзаме поддршката за повеќе медицински материјали потребни од меѓународната заедница, а исто така, да ја подобриме контролата на квалитетот, регулацијата и управувањето со производите. Ќе го дадеме придонесот на Кина за заеднички одговор на глобалната епидемија и градење заедница со заедничка иднина за човештвото.
Слика 5:Новиот реагенс за коронавирус на Liming Bio-Products Co., Ltd. го доби сертификатот за регистрација на ЕУ CE
Почесниот сертификат
Хушеншан
Слика 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. ја поддржа планинската болница Вухан Вулкан (HouShenShan) во борбата против епидемијата COVID-19 и му беше доделен почесен сертификат на Црвениот крст Вухан.Планинската болница Вухан Вулкан е најпознатата болница во Кина која е специјализирана за третман на тешки пациенти со КОВИД - 19.
Како што епидемијата на новиот коронавирус продолжува да се шири низ целиот свет, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. се засили за да ги поддржи и помогне заедниците ширум светот со нашите иновативни технологии да се борат со оваа невидена глобална закана.Брзото тестирање на инфекцијата СОВИД-19 е критичен дел од справувањето со оваа закана.Продолжуваме да придонесуваме на значаен начин со обезбедување на висококвалитетни дијагностички платформи во рацете на здравствените работници од првите редови за да можат луѓето да ги добијат критичните резултати од тестирањето што им се потребни.Напорите на Liming Bio-products Co., Ltd. во битката против пандемијата COVID-19 се да придонесе со нашите технологии, искуства и експертиза на меѓународните заедници за изградба на глобална заедница на судбина.
Долго притиснете ~ Скенирај и следете нè
Е-пошта: sales@limingbio.com
Веб-страница: https://limingbio.com
Време на објавување: мај-01-2020 година
